重组人β-防御素-2基因的植物表达载体的建立

蔡绍晖; 余懋群; 杨晓鹃; 杜军; 黄宁; 王伯瑶

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重组人β-防御素-2基因的植物表达载体的建立

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目的　运用植物转基因技术 ,探索构建表达人类 β-防御素 - 2 ( h BD- 2 )的植物生物反应器的可能性及技术路线。方法　将 C端带 myc和 6x His双标记的重组 h BD- 2基因插入植物真核表达载体 p CAMBIA13 0 4中 ,构建 C端带 m yc和 6x His双标记的重组 h BD- 2植物真核表达载体 rp CAMBIA13 0 4/ h BD- 2 / His。利用此载体转化根癌农杆菌 L BA44 0 4,经卡那霉素进行抗性基因筛选和 PCR检测 ,确定根癌农杆菌的阳性克隆。重组 h BD- 2通过转化阳性的根癌农杆菌被导入小麦幼胚愈伤组织细胞 ,经潮霉素进行抗性基因筛选 ,获得抗性愈伤组织。结果　酶切分析、PCR验证和 DNA测序等证据表明 :C端带 m yc和 6x His双标记的重组 h BD- 2已被正确地插入 p CAMBI-A13 0 4载体中 ,并位于 Ca MV 3 5 S与 Nos终止子之间 ,提示重组 h BD- 2 / His基因的植物表达载体 rp CAMBI-A13 0 4/ h BD- 2 / His已被成功构建。卡那霉素抗性基因筛选和 PCR检测显示 :rp CAMBIA13 0 4/ h BD- 2 / His已成功转化根癌农杆菌 L BA44 0 4,阳性克隆菌株已获得。潮霉素抗性筛选结果提示 :h BD- 2基因被导入小麦幼胚愈伤组织细胞。结论　本研究为进一步培育 h BD-

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来源
《四川大学学报：医学版》 |2003年第3期|385-389|共5页
作者
蔡绍晖; 余懋群; 杨晓鹃; 杜军; 黄宁; 王伯瑶;
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作者单位

暨南大学药学院;

中国科学院成都生物研究所农业高新技术与育种研究室;

日本名古屋大学医学部保健学科;

四川大学华西医学中心感染与免疫研究室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类转化及克隆;
关键词
重组人β-防御素-2基因; 植物表达载体; 植物转基因技术; 可能性; 技术路线;

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