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特异性小干扰RNA沉默CHOP对肾小管上皮细胞凋亡的影响

         

摘要

目的:研究C/EBP同源蛋白(CHOP)对肾小管上皮HK2细胞凋亡的影响.方法:采用qPCR法检测急性肾损伤患者及健康对照者血清中CHOP的mRNA水平.体外培养肾小管上皮HK2细胞,随机分为对照组、阴性组和si-CHOP组,si-CHOP组和阴性组分别转染CHOP小干扰RNA(siRNA)和阴性对照siRNA,通过转化生长因子 β1(TGF-β1)诱导细胞损伤.MTT法检测细胞的活力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blot检测细胞中细胞核抗原Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)、caspase-3和cleaved caspase-3的蛋白水平.结果:与健康对照者相比,急性肾损伤患者血清中CHOP的表达量显著增加(P<0.05);转染CHOP siRNA显著降低肾小管上皮细胞HK2中CHOP的水平,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05).敲减CHOP的表达显著增加肾小管上皮HK2细胞的活力(P<0.05),降低其凋亡率(P<0.05),增加Ki-67和PCNA的表达量(P<0.05),下调cleaved caspase-3的蛋白水平(P<0.05).结论:在急性肾损伤患者血清中CHOP的水平增加.敲减CHOP表达通过调节增殖和凋亡相关蛋白的表达抑制肾小管上皮HK2细胞的凋亡.

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