siRNA下调RYR1表达对小鼠成肌细胞中线粒体的影响

王天爽; 张静; 任雅丽; 常杏芝

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cqvip:目的:探讨雷诺丁受体1(RYR1)表达下调对小鼠成肌细胞C2C12中线粒体的影响及其发生机制。方法:采用小干扰RNA(siRNA)敲减C2C12细胞的RYR1表达,应用透射电镜对线粒体进行体视学分析,观察细胞内线粒体数目和形态学的改变,应用real-time PCR和Western blot方法检测线粒体融合蛋白2(Mfn2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的mRNA及蛋白水平的改变。结果:RYR1敲减(KD)组RYR1的mRNA水平显著降低(P<0.01)。阴性对照(NC)组及空白对照(BC)组线粒体维持长管状结构,而KD组线粒体呈碎片化改变。与NC组相比,KD组的线粒体数目呈增加趋势(差异无统计学显著性),线粒体面积和周长显著减少(P<0.05)。KD组的Mfn2在mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.01),而PGC-1α在mRNA水平显著降低(P<0.01),在蛋白水平未见明显差异;ERK1/2在mRNA水平和蛋白水平的差异均无统计学显著性,也未检测到磷酸化ERK1/2的水平变化。结论:敲减RYR1表达可以导致C2C12细胞线粒体的形态改变,Mfn2表达下调可能参与其发生,而PGC-1α及ERK1/2相关的氧化应激通路可能在其中不发挥主要作用。

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来源
《中国病理生理杂志》 |2019年第12期|2255-2261|共7页
作者
王天爽; 张静; 任雅丽; 常杏芝;
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作者单位

北京大学第一医院儿科北京 100034;

北京大学第一医院电镜室北京 100034;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类发病学;细胞生理学;
关键词
雷诺丁受体1; 线粒体融合蛋白2; 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因于1α; C2C12细胞; ERK1/2信号通路;

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