miR-375对人类诱导多能干细胞向胰岛素分泌细胞分化的影响

邓春艳; 王晗月; 李宁; 蒋豆蔻; 俞丽娜; 欧阳志斌; 李富荣

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cqvip:目的:探讨微小RNA-375(miR-375)在调控人类诱导多能干细胞(hiPSCs)分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)过程中的作用及可能机制。方法:构建miR-375过表达的慢病毒载体,转染hiPSCs获得miR-375稳定表达的miR-375-hiPSCs,体外诱导其定向分化为IPCs,采用real-time PCR、流式细胞术及ELISA等方法对其标志性基因、分化效率、胰岛素和C肽释放量等进行检测;生物信息学结合萤光素酶报告基因实验预测并验证miR-375的靶基因,real-time PCR及Western blot检测靶基因的表达。结果:过表达miR-375可上调胰岛β细胞标志性转录因子HNF4α、MafA、Pdx1、Pax6、Nkx6.1、glucokinase和insulin的表达,分化效率由对照组的22.3%提高至38.6%;高糖刺激后胰岛素释放量由成年胰岛细胞分泌量的1/8提高到1/5;过表达miR-375可影响靶基因REST和WNT5A的蛋白翻译水平。结论:miR-375可通过干扰靶基因REST和WNT5A的翻译水平,开启胰岛素分泌相关特异性基因的表达,从而促进hiPSCs向IPCs定向分化。

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来源
《中国病理生理杂志》 |2020年第5期|877-885|共9页
作者
邓春艳; 王晗月; 李宁; 蒋豆蔻; 俞丽娜; 欧阳志斌; 李富荣;
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作者单位

暨南大学第二临床医学院(深圳市人民医院)生物治疗室广东深圳518020;

暨南大学第二临床医学院(深圳市人民医院)转化医学协同创新中心深圳市干细胞研究与临床转化重点实验室广东深圳518020;

暨南大学基础医学院病理生理学系广东广州510632;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类细胞生理学;发病学;
关键词
人类诱导多能干细胞; 微小RNA-375; 胰岛素分泌细胞;

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