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黄连解毒汤对变应性鼻炎大鼠TLR4/NF-κB信号通路及黏膜杯状细胞的影响

         
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目的:探究黄连解毒汤对变应性鼻炎大鼠黏膜杯状细胞及Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响.方法:卵白蛋白制备变应性鼻炎大鼠模型,模型制作成功后分为:模型组,黄连解毒汤低、中、高剂量组,以及阳性对照组.黄连解毒汤低、中、高剂量组分别按5、10和20 g/kg生药量灌胃,阳性对照组给予丙酸氟替卡松鼻喷雾剂(每侧50μg),对照组和模型组灌胃和喷雾等体积生理盐水,每天1次,连续10 d.造模后及治疗后行为学观察评分,治疗后收集并称量鼻腔分泌物重量;PAS染色观察黏膜杯状细胞情况;HE染色观察鼻黏膜组织形态学变化;ELISA检测鼻黏膜组织中白细胞介素(IL)-4、IL-5水平;RT-qPCR检测黏膜组织中鼠钙激活氯通道3(mCLCA3)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的mRNA水平;Western blot实验检测黏膜组织中TLR4和NF-κB p65蛋白的水平.结果:造模后,与对照组相比,模型组,黄连解毒汤低、中、高剂量组,以及阳性对照组行为学评分升高(P<0.05).模型组鼻黏膜组织嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞浸润严重,炎症浸润明显,出现明显的小血管扩张和间质水肿现象;随着黄连解毒汤剂量的升高,淋巴浸润明显减少,但嗜酸性粒细胞和中性粒细胞浸润仍然存在,炎症浸润缓解.与对照组相比,模型组行为学评分、鼻腔分泌物量、黏膜组织中杯状细胞相对比例、黏膜组织中IL-4和IL-5水平、mCLCA3和MUC5AC的mRNA水平及TLR4和NF-κB p65的蛋白水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,黄连解毒汤低、中、高剂量组及阳性对照组行为学评分、鼻腔分泌物量、黏膜组织中杯状细胞相对比例、黏膜组织中IL-4和IL-5水平、mCLCA3和MUC5AC的mRNA水平及TLR4的蛋白水平显著降低(P<0.05),黄连解毒汤中、高剂量组及阳性对照组黏膜组织中NF-κB p65的蛋白水平显著降低(P<0.05).结论:黄连解毒汤降低变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织杯状细胞的相对比例,可能是通过抑制TLR4/NF-κB信号通路实现的.

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