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小胶质细胞参与新生儿缺氧缺血性脑损伤所致突触异常的研究

         

摘要

目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后突触异常的机制.方法:采用改良的Rice-Van-nucci法建立C57BL/6J和CX3CR1GFP转基因小鼠的HIBD模型.用TTC染色、HE染色、Fluoro-Jade B(FJB)染色、体重称量和行为学测试确定HIBD模型建立成功.Western blot检测吞噬相关蛋白和突触相关蛋白在脑内的表达.通过免疫荧光染色法检测突触与小胶质细胞的关系.结果:HIBD后,损伤同侧大脑出现神经元核固缩、核碎裂、核溶解;FJB染色结果显示坏死神经元增多;体重和行为学评分降低;吞噬相关蛋白溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)和髓系细胞触发受体2(TREM2)及突触相关蛋白突触致密蛋白95(PSD95)表达增加,神经元核抗原(NeuN)表达减少;免疫荧光结果显示CD11b+细胞在梗死边缘区表达LAMP1和PSD95;共聚焦显微观察证实小胶质细胞在HIBD后表达TREM2,且与突触蛋白(SYP)共定位.结论:HIBD后脑内驻留巨噬细胞——小胶质细胞的吞噬功能被激活,并通过TREM2上调吞噬功能而介导突触丢失,进而在HIBD后的行为异常中发挥作用.

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