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DNA依赖蛋白激酶催化亚基与细胞周期蛋白T2相互结合的鉴定

         

摘要

目的鉴定与DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)相互结合的蛋白,以深入探讨其生理功能.方法通过免疫共沉淀获得DNA-PKcs的相互结合蛋白复合物,SDS-PAGE电泳分离蛋白,肽质指纹分析和Westem印迹鉴定蛋白.结果以DNA-PKcs抗体进行免疫共沉淀从HeLa细胞中获得DNA-PKcs的相互结合蛋白,对部分结合蛋白进行质谱分析和蛋白数据库检索,发现转录延伸因子P-TEFb的亚基细胞周期蛋白(cyclin)T2是其中之一.其后,通过Western印迹检测,进一步证实DNA-PKcs与cyclinT2相互结合作用.结论首次发现DNA-PKcs与cyclin T2的相互结合,提示DNA-PKcs参与基因转录调控或转录偶联修复反应的生物学功能.

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