曼氏杆菌(Mannheimia pernigra)的分离鉴定及基因组序列分析

李富祥; 喻永福; 杨金丽; 朱沛; 杨仕标; 宋建领; 高华峰

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曼氏杆菌(Mannheimia pernigra)的分离鉴定及基因组序列分析

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为了对云南3起奶牛和山羊呼吸道疾病进行病原检测,本研究在5%CO2的培养条件下从呼吸道疾病奶牛和山羊的肺脏中分离到3株革兰阴性嗜二氧化碳小杆菌YN21118、YN22011和ZY171111,对3株分离株进行16S r DNA基因的PCR扩增及同源性和遗传进化分析,结果显示3株分离株与曼氏杆菌(Mannheimia pernigra)模式菌株CCUG 74657T及其它M.pernigra分离株的16S r DNA基因序列的同源性达99.6%以上,且3株分离株与M.pernigra参考株形成同一个进化分支,表明3株分离株均为M.pernigra。采用琼脂扩散法检测3株分离株对10类32种抗菌药物的敏感性,结果显示3株分离株对青霉素类的阿莫西林克拉维酸、头孢菌素类的头孢噻吩、喹诺酮类的氧氟沙星等29种抗菌药物敏感。将3株分离株感染小鼠进行致病性试验,结果显示3株分离株均能引起小鼠呼吸道疾病。采用Illumina Miseq和PacBio高通量测序平台对分离株ZY171111进行全基因组高通量测序并预测其毒力基因和耐药基因,基因组序列分析结果显示,分离株ZY171111基因组全长2 197 384 bp,G+C摩尔含量为39.1%,基因组携带1 978个蛋白编码基因,其中包括溶血素基因hlyB、黏附相关基因htpB、生存胁迫相关基因clpP和katA等32个毒力基因和磺胺类耐药基因folP、氨基糖苷类耐药基因StrA、喹诺酮类耐药基因gyr A和parC、甲氧苄啶耐药基因dfr A3等39个耐药相关基因。本研究在我国首次分离到M.pernigra,证实我国存在奶牛和山羊M.pernigra感染,并于国内外首次报道M.pernigra的耐药性、耐药基因及其对小鼠的致病性,上述结果为深入研究M.pernigra的致病性和耐药性提供菌种资源和基因组数据。

著录项

来源
《中国预防兽医学报》 |2023年第7期|698-703|共6页
作者
李富祥; 喻永福; 杨金丽; 朱沛; 杨仕标; 宋建领; 高华峰;
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作者单位

云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室;

石林彝族自治县动物疾病预防控制中心;

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正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
曼氏杆菌; 奶牛; 山羊; 分离; 致病性;

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