Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

梁伟峰; 周国辉; 刘文铭; 李超斯; 刘云; 于力

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为建立Asia1型口蹄疫(FMD)快速病原学诊断方法,本研究采用纯化的Asia1型口蹄疫病-毒(FMDV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合并筛选到一株能够稳定分泌抗Asia 1型FMDV单克隆抗体(MAb) 2E10.经间接免疫荧光试验特异性鉴定,2E10为FMDV型特异型MAb.其抗体亚类为IgG1/K,杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1∶256和1∶104,相对亲和力常数为2.5 mol/L.在此基础上,以本实验室前期制备的MAb 2D8为包被抗体,以HRP标记的MAb 2E10为检测抗体建立了检测Asia1型FMDV抗原的双抗体夹心ELISA (DAS-ELISA)方法.该方法针对FMDV细胞毒的最低检出量为103 TCID50,对O型FMDV、A型FMDV、牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒及牛传染性鼻气管炎病毒检测结果均为阴性.本研究建立的Asia1型FMDV DAS-ELISA方法为Asia1型FMD病原学诊断试剂盒的研发奠定了基础.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2016年第3期|226-229|共4页
作者
梁伟峰; 周国辉; 刘文铭; 李超斯; 刘云; 于力;
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作者单位

东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
Asia1型口蹄疫病毒; 单克隆抗体; 双抗体夹心ELISA;

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