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猪流行性腹泻病毒HeB10/2014株的分离与鉴定

         

摘要

为确定2014年河北某猪场哺乳仔猪群腹泻的病原,本研究从该发病猪场采集了22份临床样品,采用PCR方法进行腹泻病原的检测.结果显示其中17份样品为猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性,而猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)均为阴性.选取其中5份PEDV阳性样品在Vero细胞中进行病毒的分离,结果显示,仅一份样品在接种细胞24 h后即可观察到细胞病变.对病变细胞进行RT-PCR及间接免疫荧光鉴定均为PEDV阳性.将分离的病毒株命名为HeB 10/2014.将其在Vero细胞中传至F5代次后病毒增殖明显增快,病毒滴度于感染细胞24 h达到峰值.对分离株的S基因进行克隆和测序分析,结果显示该病毒分离株符合国内近年来流行病毒株S蛋白的变异特征,即在S蛋白中存在4个连续氨基酸的插入(59QGVN62)和3个氨基酸的缺失(140N和163NI164).本研究结果表明分离获得的HeB 10/2014株为国内近年来新的PEDV流行株.

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