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隐孢子虫重组蛋白包被抗原的筛选及ELISA方法的建立及初步应用

         

摘要

为建立检测牛隐孢子虫抗体的间接ELISA方法,本研究将重组表达的隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)、热休克蛋白70 (HSP70)蛋白及COWP-HSP70串联蛋白分别作为包被抗原,进行反应条件的优化,建立了3种间接ELISA检测方法.建立的这3种方法均具有较高的特异性和敏感性.与伊氏锥虫,球虫和弓形虫阳性血清均无交叉反应,最低检出血清稀释倍数分别为1:1 600、1:3 200和1:3 200.经过筛选,确定COWP-HSP70串联蛋白为包被抗原的间接ELISA方法为最佳检测方法.以该方法进行的重复性试验结果显示,其批内和批间变异系数分别为3.9%~8.2%和4.7%~8.3%.采用建立的ELISA方法与传统的粪检法分别对174份临床样品进行检测,隐孢子虫感染的检出率分别为9.2%和12.07%,两者符合率为97.13%.本研究建立的以COWP-HSP70串联蛋白为包被抗原的牛隐孢子虫间接ELISA检测方法适用于临床牛隐孢子虫感染的检测.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2015年第4期|286-290|共5页
  • 作者单位

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

    广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005;

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

    广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005;

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

    广西兽医研究所,广西南宁530001;

    广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜寄生虫学;
  • 关键词

    隐孢子虫; 卵囊壁蛋白; 热休克蛋白70; 酶联免疫吸附试验;

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