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大鼠IgG Fc片段与金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB-ClfA的融合表达及其免疫学特性

         

摘要

为提高金黄色葡萄球菌(S.aureus)串联表达的黏附素重组蛋白(rFnBPB-ClfA)的免疫效力,本研究将RT-PCR扩增的大鼠IgG Fc段基因与本实验室已构建的S.aureus FnBPB-ClfA基因串联,采用SOE-PCR进行扩增,制备Fc-FnBPB-ClfA融合基因,并将其克隆于pET-32a(+)载体中进行原核表达.将表达的重组蛋白(rFc-FnBPB-ClfA)经乳头管注射(200 μg/只)免疫哺乳期Wistar大鼠,并于加强免疫2周后,以1×109 cfuS.aureus经乳头管攻毒.结果表明,在加强免疫7d后,与rFnBPB-ClfA免疫组相比,rFc-FnBPB-ClfA免疫组血清和乳清中的抗体水平明显增高,而且IgG水平动态检测结果表明,其特异性抗体上升趋势明显高于rFnBPB-ClfA免疫组.攻毒保护试验证明,rFc-FnBPB-ClfA和rFnBPB-ClfA免疫组对S.aureus清除率均显著高于对照组(p<0.01).本研究结果表明,rFc-FnBPB-ClfA对S.aureus乳房炎的免疫效果更佳,为进一步研制有效防治S.aureus乳房炎疫苗提供了实验依据.

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