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弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与AMA1羧基端相互作用蛋白的筛选

         

摘要

为筛选弓形虫AMA1基因羧基端(AMA1c)在弓形虫中的相互作用分子,本研究采用MatchmakerTMGold酵母双杂交系统,构建了弓形虫RH株酵母双杂交cDNA文库,文库滴度达到4.26×107 cfu/mL.以构建的pGBKT7-AMA1c诱饵质粒,使用PEG/LiAc法转化酵母菌株Y2H,利用表型筛选法检测AMA1c的自激活作用并进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆,根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证.结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中具有无毒性和自激活作用,而且通过酵母双杂交筛选共得到13个与AMA1c蛋白相互作用的虫体蛋白.本研究结果为进一步研究AMA1c的功能奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2014年第3期|201-204|共4页
  • 作者单位

    吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室-美国密西根州立大学天然免疫联合实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133000;

    东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室-美国密西根州立大学天然免疫联合实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室-美国密西根州立大学天然免疫联合实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜寄生虫学;
  • 关键词

    弓形虫; AMA1羧基端; 酵母双杂交; 自激活;

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