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抗新城疫病毒HN蛋白单链抗体的原核表达及其功能鉴定

         

摘要

为制备抗鸡新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗NDV HN单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA,通过RT-PCR扩增抗HN蛋白抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其插入含有Linker序列的载体pET-scIG中,构建抗HN的scFv (HN-scFv)原核表达重组质粒pET-HN-scFv并在大肠杆菌中诱导表达.结果显示HN-scFv主要以包涵体形式存在.将包涵体进行复性和Ni-NTA层析柱纯化后用于流式细胞仪检测,结果显示复性纯化后的HN-scFv能够识别表达于293T细胞表面的NDV HN蛋白.该scFv的制备为进一步对该抗体进行改造奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2014年第5期|383-386|共4页
  • 作者单位

    福建农林大学动物科技学院,福建福州350000;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    福建农林大学动物科技学院,福建福州350000;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    福建农林大学动物科技学院,福建福州350000;

    福建农林大学动物科技学院,福建福州350000;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    单链抗体; 新城疫病毒; 血凝素-神经氨酸酶;

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