新城疫病毒和传染性支气管炎病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立

屈素洁; 施开创; 邹联斌; 张步娴; 梁媛; 莫胜兰; 粟艳琼; 胡杰; 李军

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为建立鸡新城疫病毒(NDV)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的快速鉴别检测方法,本研究根据NDV和IBV的基因保守序列,设计了2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针;经过对反应条件的优化,建立了能够同时检测NDV和IBV的双重荧光定量RT-PCR方法.该方法对NDV和IBV的检测灵敏度均为10拷贝/μL,比常规RT-PCR敏感性高100倍;该方法对禽流感病毒、传染性喉气管病病毒、鸡白血病病毒、禽呼肠弧病毒检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性;批内和批间重复变异系数均小于2％.利用所建立的双重荧光定量RT-PCR方法及常规RT-PCR,对185份组织样品进行检测,符合率为100％.该方法可以用于NDV和IBV的快速定量检测.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2014年第11期|867-871|共5页
作者
屈素洁; 施开创; 邹联斌; 张步娴; 梁媛; 莫胜兰; 粟艳琼; 胡杰; 李军;
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作者单位

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

广西区动物疫病预防控制中心,广西南宁530001;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
新城疫病毒; 传染性支气管炎病毒; 双重荧光定量RT-PCR;

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