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甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

         
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摘要

To establish detect method for the Pandemic/2009 influenza virus infection in swine, A TaqMan real-time RT-PCR was developed based on primers and TaqMan probe derived from pH1N1/09 HA gene. A serial dilution of recombinant plasmid of pMD-H1-HA was prepared and used to generate standard curves. The results showed that the sensitivity of the real-time RT-PCR was 50 TCID50, with a correlation coefficient of 0.999 and no cross-reaction with classical swine H1, Eurasian avian-like H1, human-like H1, or H1N2, H3N2, H5N1, H9N2 influenza viruses. The results demonstrate that this assay is efficient for the diagnosis of pH1N1/09 virus in both human and animal.%为建立快速检测甲型H1N1流感病毒[Influenza A(H1N1) pdm09]的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因保守序列,设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,采用实时荧光定量PCR技术检测甲型H1N1流感病毒.使用含有选定检测序列的重组质粒pMD-HA标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999,敏感性可达50 TCID50.本研究中,甲型H1N1流感病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法与经典H1N1、类禽H1N1、类人H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2流感病毒无交叉反应.结果表明,该方法可以在人类和动物间有效地检测甲型H1N1流感病毒.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2013年第1期|36-39|共4页
  • 作者

    尹航; 杨焕良; 陈艳; 孟沙沙; 刘丽萍; 辛晓光; 陈化兰; 乔传玲;

  • 作者单位

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    东北农业大学,黑龙江哈尔滨150030;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    猪流感病毒; H1N1亚型; TaqMan MGB探针; 实时荧光定量PCR;

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