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羊附红细胞体巢式PCR检测方法的建立及临床应用

         

摘要

根据GenBank上发表的羊附红细胞体16S rRNA基因序列(登录号AF338268)设计2对引物,用巢式PCR方法扩增16S rRNA的部分序列,将目的片段克隆并测序.测序结果与AF338268相似性达99%以上,只有3 bp的差异.该方法与猪附红细胞体、羊肺炎支原体、链球菌、葡萄球菌和大肠杆菌均无交叉反应,能检测到的最低DNA量为25龟.用于检测的28份临床样本中,23份为阳性.所建立的巢式PCR检测方法具有较高的敏感性和特异性,可用于羊附红细胞体病急性感染和隐性感染的早期诊断,为该病的临床检测、流行病学调查、进出口检疫和实验室研究提供了新的技术手段.

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