微小牛蜱一个抗菌多肽编码基因的克隆和表达

白霞; 周金林; 程天印; 周勇志; 龚海燕

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微小牛蜱一个抗菌多肽编码基因的克隆和表达

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为了进行抗蜱及蜱传病疫苗的研究,本研究根据微小牛蜱巴西株报道的一种抗菌多肽核苷酸序列设计引物,从微小牛蜱中国安徽株克隆到该抗菌多肽基因,全长383bp,编码110个氨基酸残基,该蛋白预测的分子量为12.2ku,等电点为4.87.经同源性比较,该微小牛蜱巴西株抗菌多肽基因有100%的相同性.经RT-PCR分析表明,该基因在微小牛蜱卵、幼蜱、半饱血雌蜱、饱血雌蜱和雄蜱这几个阶段均有表达.将该基因亚克隆到pET-28a(+)表达载体,转化BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导,可成功表达.重组融合蛋白大小为15ku左右,与预期大小一致.初步体外抗菌试验表明,重组蛋白具有一定的抗菌活性.Western-blot显示,兔抗微小牛蜱唾液抗体能够识别重组表达蛋白.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2005年第2期|134-138|共5页
作者
白霞; 周金林; 程天印; 周勇志; 龚海燕;
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作者单位

中国农业科学院,上海家畜寄生虫病研究所,上海,200232;

湖南农业大学,动物科技学院,湖南,长沙,410128;

中国农业科学院,上海家畜寄生虫病研究所,上海,200232;

湖南农业大学,动物科技学院,湖南,长沙,410128;

中国农业科学院,上海家畜寄生虫病研究所,上海,200232;

中国农业科学院,上海家畜寄生虫病研究所,上海,200232;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类蜱、螨类;转化及克隆;
关键词
微小牛蜱; 抗菌多肽; cDNA克隆; 重组表达;

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