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J-亚群禽白血病JL-2株的分离鉴定

         

摘要

近年来,J-亚群禽白血病的暴发流行在国内时有报道,在本研究中,自吉林某患病鸡群分离出一株病毒,采用特异性引物,经RT-PCR扩增出长度为545 bp的J-亚群禽白血病病毒特异性核苷酸片段;将病毒经SPF鸡胚成纤维细胞增殖,获取其前病毒DNA,依据原型毒株HPRS-103 cDNA序列设计并合成一对引物,经PCR扩增得到包括gp85、gp37、Eelement基因在内的近1.8 kb的DNA片段,将其连到pMD18-T载体上,转化大肠杆菌JM109,培养后提取质粒分别用Hind Ⅲ,BamHI进行单酶切和双酶切鉴定,得到了阳性重组质粒pMD18-T-JL2/env,核苷酸序列测定结果表明,该片段为J-亚群禽白血病病毒囊膜基因,其中亚型特异性片段gp85和标准对照毒株HPRS-103的同源率为94%,所编码氨基酸的同源率为87%.

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