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利用信息肽诱导和Cre/LoxP系统构建猪链球菌基因缺失株

         

摘要

为建立一种高效的猪链球菌(Streptococcus suis)基因缺失方法,本研究利用信息肽诱导DNA片段转化和Cre/LoxP系统去除抗性基因这两种技术,通过在S.suis 05ZYH33的ssu05 1921基因上、下游片段和壮观霉素抗性基因(spc)片段之间引入LoxP位点,采用信息肽GE9诱导构建的DNA片段转化S.suis并发生重组,经抗性筛选快速获得spc替代ssu05_1921基因的缺失株;进一步引入pSET6s/PtufA-cre质粒表达Cre重组酶作用于LoxP位点,去除spc基因,产生无痕ssu05_1921基因缺失株,经测序和RT-PCR验证缺失正确.本研究建立的该方法简单、快捷、阳性率高,为构建S.suis基因缺失株、研究S.suis致病机制提供了新的选择.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2019年第2期|125-130|共6页
  • 作者单位

    新疆农业大学动物医学院;

    新疆乌鲁木齐8300522;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

    黑龙江哈尔滨150069;

    新疆农业大学动物医学院;

    新疆乌鲁木齐8300522;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 病原细菌;
  • 关键词

    猪链球菌; 信息肽诱导; Cre/LoxP系统; 基因缺失;

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