鸭源H7N9亚型流感病毒HA蛋白的真核表达及其免疫保护效力分析

ZHOU Chen-chen; SHI Jian-zhong; LI Cheng-jun; CHEN Hua-lan; JIANG Li; LIANG Li-bin; ZHAO Qing-qing; HUANG Shan-yu; LI Qi-bing; WANG Guang-wen; LI Jun-ping; ZHAO Yu-hui; ZENG Xian-ying

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为进行鸭源H7N9亚型流感病毒HA蛋白表达纯化及其免疫保护效力分析,本研究以鸭源流感病毒A/Duck/Fujian/S4170/2014 (H7N9)HA基因为模板,PCR扩增后将HA片段克隆至昆虫细胞表达载体pFastBac1中.将构建的重组质粒pFBacH7HA转化DH 10B ac感受态细胞,提取PCR鉴定为阳性的重组杆粒Bacmid-H7HA,转染SF9昆虫细胞.结果显示重组Bacmid-H7HA表达HA蛋白,并装配成重组杆状病毒,将该病毒感染High Five细胞,大量表达H7-HA蛋白.免疫荧光试验、SDS-PAGE及western blot分析结果表明H7-HA蛋白正确表达且纯度达90％以上,血凝试验表明表达蛋白具有良好的生物活性.利用纯化的H7-HA蛋白免疫SPF鸡后进行攻毒保护试验,评价该蛋白作为免疫原对SPF鸡的免疫保护效力,结果显示HA蛋白免疫组鸡只得到100％保护.以上结果表明本研究表达纯化的H7-HA蛋白可以作为防控H7亚型禽流感的候选亚单位疫苗.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2019年第1期|58-62|共5页
作者
ZHOU Chen-chen; SHI Jian-zhong; LI Cheng-jun; CHEN Hua-lan; JIANG Li; LIANG Li-bin; ZHAO Qing-qing; HUANG Shan-yu; LI Qi-bing; WANG Guang-wen; LI Jun-ping; ZHAO Yu-hui; ZENG Xian-ying;
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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
H7N9; HA蛋白; 杆状病毒表达; 免疫保护;

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