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犬瘟热与犬副流感病毒双重一步法RT-PCR检测方法的建立

         

摘要

为建立可以同时检测犬瘟热病毒(CDV)和犬副流感病毒(CPIV)的检测方法,依据GenBank中登录的CDV的H基因和CPIV的NP基因保守序列,设计合成扩增序列分别为593 bp (CDV H基因)、1 530 bp (CPIV NP基因)的2对引物,通过优化反应条件,建立一种能够同时检测CDV和CPIV的双重一步法RT-PCR检测方法.特异性和敏感性试验显示,该方法能特异地检测CDV和CPIV,其最低检测限分别为3.58×106拷贝/μL和1.74×106拷贝/μL.对51份临床疑似病料样品进行检测,同时分别采用商品化的CDV和CPW抗原检测试剂盒进行检测,结果二者符合率为100%.该结果表明本实验所建立的双重一步法RT-PCR方法的灵敏度及特异性均较好,可用于临床相关疫病的诊断.

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