胸膜肺炎放线杆菌Apx ⅢA、Apx ⅣA蛋白表达及重组亚单位疫苗的研究

宋丹; 李鹏; 刘翠翠; 陈金顶; 易琳; 丁红星; 赵明秋

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cqvip:为研制以胸膜肺炎放线杆菌(APP) 4种外毒素蛋白(ApxⅠA、ApxⅡA、ApxⅢA、ApxⅣA)和外膜蛋白(OMP)为组分的亚单位疫苗,在本研究室已表达纯化的r ApxⅠA、r ApxⅡA、r OMP的基础上,本研究通过PCR扩增得到ApxⅢA、ApxⅣA基因,并分别将其克隆至表达载体p ET-32a中,测序验证后将重组质粒转化入宿主菌BL21 (DE3),经IPTG诱导表达后获得重组蛋白r ApxⅢA和r ApxⅣA。将获得的5种蛋白(rApxⅠA、r ApxⅡA、r ApxⅢA、r ApxⅣA和r OMP)按一定比例混合制备成亚单位疫苗免疫BALB/c雌鼠进行免疫效果测定,设灭活疫苗组(Ⅰ组)、弗氏佐剂乳化的亚单位疫苗组(Ⅱ组)、白油佐剂乳化的亚单位疫苗组(Ⅲ组)、灭活疫苗+白油佐剂乳化的亚单位疫苗组(Ⅳ组)和PBS组(Ⅴ组)。Western blot结果显示,表达了重组蛋白r ApxⅢA和r ApxⅣA且具有较好的反应原性;抗体检测结果显示,加强免疫后,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的r ApxⅠA、r ApxⅢA、r ApxⅣA和r OMP抗体水平基本一致(p>0.05),均显著高于Ⅴ组和Ⅰ组(p0.05),显著高于Ⅴ组(p<0.05)。表明本研究中的亚单位疫苗具有一定的免疫保护效果,为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。

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来源
《中国预防兽医学报》 |2019年第8期|836-841|共6页
作者
宋丹; 李鹏; 刘翠翠; 陈金顶; 易琳; 丁红星; 赵明秋;
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作者单位

华南农业大学兽医学院广东广州510642;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
胸膜肺炎放线杆菌(APP); 表达; 亚单位疫苗;

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