一种基于VP0蛋白检测DHAV(1型和3型)血清抗体的间接ELISA的建立及应用

马波; 王君伟; 戚海惠; 张文晶; 陈浩田; 张琪; 常蕊; 刘悦; 张雪莲; 张桂红

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cqvip:为建立一种快速检测鸭甲肝病毒(DHAV)1型和3型(DHAV-1、DHAV-3)血清抗体的方法,本研究诱导表达了DHAV-1、DHAV-3重组蛋白VP0、VP1、VP3,并采用ELISA方法比较了3者的反应原性,结果显示DHAV-1 VP0更适合作为检测DHAV-1、DHAV-3血清抗体的通用型诊断抗原。经各反应条件优化,建立了一种基于DHAV-1 VP0重组蛋白的可同时检测DHAV-1、DHAV-3血清抗体的间接ELISA方法。优化的主要反应条件为:抗原包被浓度为0.25μg/m L,待检血清稀释度为1100,山羊抗鸭HRP-IgG 1400稀释。该方法特异性较强,只与DHAV-1、DHAV-3阳性血清反应,与鸭源小鹅瘟病毒(GPV)、鸭病毒性肠炎病毒(DEV)、H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)等阳性血清均无交叉反应;敏感性为1320;批内变异系数小于4%,批间变异系数小于6%;与商品化的ELISA抗体检测试剂盒比较,二者阳性符合率为93.3%,阴性符合率为88.9%,总符合率为95.7%,且该方法可用于临床血清样本的检测。本研究为检/监测DHAV血清抗体水平提供了技术手段。

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来源
《中国预防兽医学报》 |2020年第3期|245-251|共7页
作者
马波; 王君伟; 戚海惠; 张文晶; 陈浩田; 张琪; 常蕊; 刘悦; 张雪莲; 张桂红;
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作者单位

东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030;

华南农业大学兽医学院广东广州510642;

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正文语种 chi
中图分类 S852.53;
关键词
鸭甲型肝炎病毒; VP0蛋白; ELISA; 免疫反应性;

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