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首页> 中文期刊> 《中国预防兽医学报》 >3种TLR配体对猪圆环病毒2型病毒样颗粒疫苗佐剂活性的比较

3种TLR配体对猪圆环病毒2型病毒样颗粒疫苗佐剂活性的比较

         
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摘要

为比较3种TLR配体对猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)疫苗的佐剂活性,本研究利用重组大肠杆菌表达脑膜炎奈瑟菌Ag473脂蛋白、创伤弧菌FlaB鞭毛蛋白和结核分枝杆菌热应激蛋白70(Hsp70),采用镍亲和柱纯化获得该3种重组蛋白;分别将相同剂量(10μg)3种重组蛋白、ISA206佐剂(100μL)和不完全弗氏佐剂(FIA)(100μL)与PCV2 VLP疫苗(50μg)混合,肌肉注射免疫小鼠,初免后14 d加强免疫1次;初免后每周采血分离血清,采用ELISA检测抗原特异抗体;加强免疫后14 d利用PCV2攻毒,攻毒后7 d和14 d采血分离血清,采用荧光定量PCR检测病毒DNA拷贝数;攻毒后14 d迫杀小鼠,制备并培养其脾细胞,经PCV2 VLP疫苗刺激后,采用试剂盒检测细胞因子的表达.SDS-PAGE分析结果显示,3种TLR配体在重组大肠杆菌中均获得正确表达,纯化重组蛋白的纯度大于90％.从初免14 d起,3个分子佐剂组中Ag473佐剂组的PCV2抗体水平最高,但低于ISA206佐剂组却高于FIA组,差异不显著(p>0.05).在PCV2攻毒前,3个分子佐剂组中Ag473佐剂组的小鼠脾细胞TNF-α和IFN-γ表达水平最高,但低于ISA206佐剂组却高于FIA组,差异显著(p<0.05);Hsp70佐剂组的IL-4表达水平最高,Ag473佐剂组次之,但均高于ISA206和FIA组.在攻毒后第7 d,5个免疫组小鼠的病毒拷贝数均较对照组显著下降(p<0.05),但免疫组间差异不显著;在攻毒后第14 d,5个免疫组小鼠的病毒拷贝数进一步下降,免疫组间差异不显著.研究结果表明在测试的3种分子佐剂中,Ag473脂蛋白具有较强的总体免疫佐剂活性,有望进一步开发为PCV2等病毒的亚单位疫苗佐剂.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2020年第6期|595-600|共6页
  • 作者

    李洋洋; 宗扬; 程健; 王亚杰; 张鑫宇; 夏晓莉; 孙怀昌;

  • 作者单位

    扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 江苏 扬州 225009;

    扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 江苏 扬州 225009;

    扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 江苏 扬州 225009;

    扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 江苏 扬州 225009;

    扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 江苏 扬州 225009;

    扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 江苏 扬州 225009;

    扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 江苏 扬州 225009;

    江苏农牧科技职业学院 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室 江苏 泰州 225300;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    猪圆环病毒2型; 病毒样颗粒疫苗; 分子佐剂; 活性比较;

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