效应蛋白Rhs对鼠伤寒沙门菌生物学特性影响的研究

董震; 王志林; 陈启伟; 吴锦艳; 尚佑军; 刘永生; 杨世华; 兰喜

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为探究鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)Ⅵ型分泌系统(T6SS)分泌的效应蛋白Rhs对该菌生物学特性的影响,本研究利用Red同源重组技术构建了鼠伤寒沙门菌rhs1和rhs2基因缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2,同时构建了基因回补菌株C-Δrhs1和C-Δrhs2,并经PCR和测序鉴定正确后,测定了鼠伤寒沙门菌亲本株和缺失株的遗传稳定性、生长曲线,结果显示,缺失株经过多次传代后仍然具有稳定的遗传性;Rhs效应因子缺失对细菌的生长未造成明显影响。进一步利用各菌株感染Hela细胞,对菌株黏附力和侵袭力进行测定,结果显示,与亲本株相比,缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2对Hela细胞的黏附力无明显影响,但侵袭力分别提高了4.9倍和3.4倍。利用各菌株感染RAW264.7巨噬细胞,检测各株菌在RAW264.7细胞内的存活力,结果显示缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2在RAW264.7细胞内存活力分别提高了7.8倍和5.9倍。将各菌经株腹腔注射感染小鼠,检测其对小鼠的半数致死量(LD_(50)),结果显示,亲本株的LD_(50)为2.53×10^(6) cfu/mL,缺失株CVCC541Δrhs1、CVCC541Δrhs2的LD_(50)分别为1.31×10^(7) cfu/mL和5.40×10^(6) cfu/mL,LD_(50)分别下降了5.2倍和2.1倍。本研究首次证实效应蛋白Rhs会影响鼠伤寒沙门菌的侵袭力和细胞内的生存能力,同时也会降低细菌的毒力,在鼠伤寒沙门菌感染过程中发挥了作用,该结果为阐释鼠伤寒沙门菌的致病机制提供了参考。

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来源
《中国预防兽医学报》 |2022年第2期|126-133|共8页
作者
董震; 王志林; 陈启伟; 吴锦艳; 尚佑军; 刘永生; 杨世华; 兰喜;
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作者单位

华南农业大学兽医学院;

中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;

甘肃省定西市安定区畜牧兽医局;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
鼠伤寒沙门菌; 效应蛋白Rhs; 生物学特性;

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