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X线反复照射人食管鳞癌细胞系KYSE-150的生物效应研究

         

摘要

目的建立人食管鳞癌放射抗拒性细胞系,并检测肿瘤干细胞标志物的表达,以期了解肿瘤干细胞与放射抗拒性形成之间的关系。。方法分次照射建立人食管鳞癌放射抗拒性细胞系KYSE-150R,在相差显微镜下观察细胞形态学差异,用G显带法进行染色体分析。用成克隆实验验证KYSE-150和KYSE-150R细胞的放射敏感性差异,流式细胞术检测它们的细胞周期分布,WesternBlotting法检测它们中肿瘤下细胞(CSCs)标志物β-catenin和Integrin-β1的表达。结果 KYSE-150R细胞的群体倍增时间长于亲代细胞KYSE-150[(25.90±0.55)h:(23.62±0.23)h,t=6.62,P=0.00]。KYSE-150R细胞的染色体数目增加,并观察到染色体畸变。KYSE-150R细胞SF2、D0、Dq及N值均高于KYSE-150细胞,D0值比为1.21。流式细胞仪分析显示KYSE-150细胞照射后S期比例增加(45.35%±4.03%:55.09%±1.70%,t=-3.86,P=0.02),G2+M期比例下降(9.91%±3.83%:1.15%±0.32%,t=3.95,P=0.02),而KYSE-150R则变化不大。Western Blotting结果显示KYSE-150R中的β-catenin和Integrin-β1的表达量约为KYSE-150细胞的2倍。结论新细胞系KYSE-150R比其亲本更具放射抗拒性,其含有的CSCs比例电较其亲本高,证明CSCs与放射抗拒性产生机制有关。

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