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低剂量照射对慢性髓细胞白血病干细胞p16基因mRNA表达水平的影响及其意义

         

摘要

目的探讨低剂量辐射(LDR)对慢性髓细胞白血病干细胞(LSCs)中P16基因转录表达的影响及其临床意义。方法取20例健康产妇脐血100ml,免疫磁株法分离纯化CD34+、CD38-的正常造血干细胞(HSCs)作为对照组;取20例初诊慢性髓细胞白血病(CML)慢性期患者骨髓液5~10ml,免疫磁株法分离纯化CD34+、CD38-、CD123+的LSCs作为实验组。将HSCs及LSCs依据LDR剂量(0、12.5和50cGy)辐照后收集细胞行RT-PCR和荧光实时定量PCR检测两种干细胞中p16基因的变化;另辐照后分别于24、48和72h收集细胞,流式细胞仪检测两种干细胞的细胞周期和凋亡率。结果CML-LSCs经12.5cGy剂量照射后P16mRNA表达略上调,50cGy照射后明显增高(Z=-3.39,P<0.01),而HSCs经各剂量点LDR处理后p16基因转录水平无明显变化。CML-LSCs经12.5cGy剂量处理后48h出现G0/G1期阻滞,50cGy剂量点照射后72h出现了G0/G1期阻滞现象。CML-LSCs经LDR处理后,细胞的早期凋亡率随时间推移逐渐增加,50cGy剂量照射后72h处达到(17.75±11.76)%,与未照射组(6.13±4.71)%相比差异有统计学意义(Z=-2.37,P<0.05)。结论LDR可诱导CML-LSCs中P16基因转录水平的表达上调,使得CML-LSCs阻滞在G0/G1期,促进LSCs的凋亡,为P16基因作为CML中治疗的靶点及LDR在白血病中的应用提供理论依据。

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