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B细胞淋巴瘤因子6在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞诱导的破骨细胞形成及活化中的动态变化及意义

         

摘要

目的探讨B细胞淋巴瘤因子(Bcl)6在RA破骨细胞形成及活化过程中的动态变化及意义。方法体外分离培养RA成纤维样滑膜细胞(FLS),加入巨噬细胞集落刺激因子,与健康人PBMCs共培养0、7、14、21 d,细胞免疫荧光、Real-time PCR分别检测破骨细胞及前体Bcl6蛋白和mRNA表达;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定破骨细胞,甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝情况。多组间均数比较采用Kruskal-WallisH检验和Bonferroni法进行统计学分析。结果①健康人PBMCs中Bcl6蛋白表达弱,主要表达于细胞核;培养7 d时,部分PBMCs分化成巨噬细胞及少量TRAP(+)多核破骨细胞[(664±78)个/孔],破骨细胞及其前体总体Bcl6蛋白表达升高;14 d时总体Bcl6蛋白表达继续升高;21 d时PBMCs基本被诱导分化为多核破骨细胞,后者细胞核中表达的Bcl6蛋白减少,总体Bcl6蛋白表达亦降低。②RAFLS与PBMCs共培养至7 d时,破骨细胞及前体总体Bcl6 mRNA量较0 d时升高,但差异无统计学意义(x~2=3.429,P>0.05);至14 d时Bcl6 mRNA量较0 d时显著升高(x~2=5.333,P=0.045);至21 d时则较14 d时明显降低(x~2、=6.023,P=0.038)。结论 Bcl6可能参与调控RA破骨细胞的形成及活化以及PBMCs分化为巨噬细胞的炎症过程,相关机制值得进一步研究。

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