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首页> 中文期刊> 《中华风湿病学杂志》 >Sonic Hedgehog信号通路对内皮细胞凋亡影响的初步研究

Sonic Hedgehog信号通路对内皮细胞凋亡影响的初步研究

         
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目的初步探讨类风湿关节炎（RA）滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白的表达,并观察肿瘤坏死因子（TNF）-α作用于人脐静脉内皮细胞系EA.hy926细胞后Sonic Hedgehog（Shh）信号通路相关分子的表达,及特异性抑制Smo对细胞凋亡的影响。方法收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织,同时收集4例外伤或半月板损伤（无关节炎）者滑膜组织作为对照组,免疫组织化学法检测滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白表达情况。予不同浓度TNF-α或联合不同浓度环巴胺处理EA.hy926细胞,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1 mRNA表达。予不同浓度环巴胺处理EA.hy926细胞,加入TNF-α+放线菌素D（ActD）诱导细胞凋亡,采用细胞增殖与毒性试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况。两样本均数比较采用t检验,多个样本均数比较采用单因素方差分析。结果RA患者滑膜血管内皮细胞Smo阳性表达率为（81±23）%,高于对照组阳性表达率（20±17）%（P＜0.05）。EA.hy926细胞经TNF;-α刺激后,Shh、Smo mRNA表达上调（P＜0.05）,Ptch1 mRNA表达无明显变化（P＞0.05）,Gli1 mRNA表达下调（P＜0.05）。TNF-α与环巴胺共同作用后,Shh、Smo和Gli1 mRNA表达下调（P＜0.05）。不同浓度环巴胺（分别为2、4、8μmol/L）作用后的细胞存活率分别为（57±6）%、（44±8）%、（32±5）%,低于TNF-α/ActD组细胞存活率（64±6）%（P＜0.05）,细胞凋亡率分别为（12.4±33）%、（14.5±2.7）%、（15.7±2.4）%,高于TNF-α/ActD组细胞凋亡率（7.1±1.3）%（P＜0.05）。结论 Shh信号通路在RA患者滑膜组织血管内皮细胞中存在激活。特异性抑制Shh信号通路,可以促进内皮细胞凋亡。Shh信号通路可能参与TNF-α作用于内皮细胞后的抗凋亡调控机制。

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