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ATP结合盒转运蛋白在胶原诱导性关节炎模型鼠的差异表达及其与血清炎性细胞因子的相关性研究

         
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目的 探讨炎性细胞因子与ATP结合盒（ABC）转运蛋白表达调控的相关性。方法 建立Ⅱ型胶原诱导的小鼠胶原诱导性关节炎（CIA）模型,将造模成功的14只小鼠于初次免疫后7周处死取材。根据滑膜病理评分将CIA组分为轻度病变组、中重度病变组,选取4只健康小鼠作为正常对照组。通过流式多种蛋白定量技术（CBA）检测血清中IL-1β,IL-2,IL-6,IL-10,TNF-α,IL-17的水平。采用反转录（RT）-PCR检测脾淋巴细胞中的P-糖蛋白（P-gp）,乳腺癌耐药蛋白（BCRP）,多药耐药相关蛋白1（MRP1）的mRNA表达水平。进一步分析不同炎性细胞因子与耐药蛋白的相关性及其浓度依赖性,选出最具相关性的蛋白进行关节滑膜免疫组织化学定位分析。采用Mann-WhitneyU检验,非参数Kruskal-WallisH和Spearman相关分析。结果 ① 3组IL-6相比,中重度CIA组[45.03（38.87,64.02） pg/ml]高于轻度组[25.31（15.15,29.27） pg/ml]、正常对照组[7.75（5.14,9.17） pg/ml]（Z=14.383,P＆0.05）；3组TNF-α比较,相较于正常对照组[22.81（20.84,28.17） pg/ml],轻度[45.00（32.76,58.51） pg/ml]、中重度CIA组[45.00（39.78,58.95） pg/ml]均升高（Z=8.375,P＆0.05）,中重度CIA组与轻度CIA组相比,差异无统计学意义（P＆0.05）。②中重度CIA组MRP1 mRNA[2.07（1.77,2.22） pg/ml]高于轻度CIA组[1.32（1.08,1.49） pg/ml]、正常对照组[1.08（0.65,1.30） pg/ml]（Z=12.634,P＆0.05）。3组P-gp,BCRP的mRNA差异无统计学意义。MRP1与P-gp有相关性（r=0.635,P=0.015）。③ MRP1 mRNA的表达与IL-6呈正相关（r=0.711,P=0.004）。④ MRP1的表达与IL-6水平有一定浓度依赖性。⑤与正常对照组相比,CIA模型组膝关节与踝关节滑膜组织细胞胞质/胞膜呈棕黄色,提示MRP1表达阳性。结论 在CIA关节炎模型中,ABC转运蛋白家族中MRP1表达与滑膜病变严重程度相关,且其与血清中炎性因子IL-6水平高度相关。

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