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温针灸抑制NLRP3炎症小体激活改善兔膝骨关节炎的软骨损伤

         

摘要

背景:温针灸治疗膝骨关节炎疗效显著,但其作用机制尚不明确。目的:观察温针灸对兔膝骨关节炎软骨组织中NLRP3、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、Ⅰ型胶原蛋白表达的影响。方法:取6月龄新西兰雄兔40只,采用随机数字表法分成空白组、模型组、温针灸组、抑制剂组,每组10只:除空白组外,其他3组均采用石膏管型固定法建立右后肢膝骨关节炎模型。造模成功后,温针灸组进行温针灸治疗,1次/d,连续治疗4周;抑制剂组膝关节腔内注射NLRP3抑制剂MCC950,1次/周,注射4次。干预结束后,采用Lequesne MG评分评估兔行为学改变,苏木精-伊红染色观察软骨形态学结构,免疫组织化学染色及蛋白质印迹法检测软骨组织中NLRP3、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果与结论:(1)Lequesne MG评分:模型组Lequesne MG评分高于空白组(P<0.05),温针灸组、抑制剂组Lequesne MG评分低于模型组(P<0.05);(2)苏木精-伊红染色:与空白组比较,模型组软骨细胞数量减少,结构完整性被破坏,Mankin’s评分升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组、抑制剂组软骨细胞分布较均匀,软骨层结构相对清晰,Mankin’s评分降低(P<0.05);(3)免疫组织化学与蛋白质印迹检测:与空白组比较,模型组NLRP3、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13表达升高(P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,温针灸组与抑制剂组NLRP3、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13表达降低(P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);(4)结果表明:温针灸可抑制NLRP3炎性启动因子的激活、下调炎性因子基质金属蛋白酶3,13的释放,降低炎性放大反应,减缓Ⅰ型胶原蛋白的降解,降低膝骨关节炎的关节软骨损伤及局部破坏。

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