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聚酰胺树形分子高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸诱导血管内皮细胞凋亡

         

摘要

目的:观察聚酰胺树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,asODN)传递系统的可行性以及对人脐血管内皮细胞的survivin表达、细胞生长的影响。方法:实验于2005-05/2006-03在上海交通大学微纳米科学技术研究院微纳制造技术国家重点实验室完成。①将200μg/Lsurviving-asODN和3.66μg/L聚酰胺制备聚酰胺反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照。②透射电镜观察复合物的形态、粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率、载药率和体外DNA释放速度。③将上述两种基因载体复合物转染人脐血管内皮细胞,测定其转染效率;Westernblotting检测转染后细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测两组细胞的凋亡率。结果:①成功制备聚酰胺反义基因载体系统聚酰胺-survivin-asODN。该复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物(P0.05);聚酰胺对DNA持续释放14d,但脂质体只持续5d。②聚酰胺-survivin-asODN转染人脐血管内皮细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05),转染后人脐血管内皮细胞siurvivin蛋白的表达低于脂质体复合物(P<0.05),该细胞的凋亡率高于脂质体复合物(P<0.05)。结论:聚酰胺能将Survivin-asODN高效递送到人脐血管内皮细胞,降低survivin蛋白的表达并诱导血管内皮细胞凋亡。

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