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脂联素干预高糖介导人牙周膜细胞凋亡的相关机制

         

摘要

背景:脂联素是最近发现的一种由脂肪细胞分泌的特异蛋白质,因其在调节糖脂代谢和抗氧化应激等方面的功效,而被认为是治疗糖尿病及其并发症的潜在物质.目的:探讨脂联素干预对高糖介导人牙周膜细胞凋亡及其经典Wnt/β-catenin信号转导通路的影响.方法:体外复苏培养人牙周膜细胞.将所有细胞随机平均分为4组:对照组(正常RPMI1640完全培养基,葡萄糖浓度为11 mmol/L),高糖组(葡萄糖浓度40 mmol/L的RPMI1640培养基),甘露醇组(RPMI1640培养基+甘露醇19.5 mmol/L)和脂联素组(葡萄糖浓度40 mmol/L的RPMI1640培养基+20 mg/L脂联素).在培养24-96 h后的不同时间点,采用MTT法检测各组细胞的细胞存活情况,采用流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡情况的变化.通过RT-PCR和Western blot检测Wnt1、Wnt10b及β-catenin的表达水平.结果与结论:①高糖在体外对人牙周膜细胞有显著的抑制增殖和促进凋亡作用,但对细胞周期的影响不明显;②人牙周膜细胞经体外高糖培养基培养24-96 h后,其抑制增殖作用呈时间依赖性;而脂联素则显著提高了高糖干预下细胞的增殖并抑制了细胞凋亡(P<0.05);③RT-PCR和Western blot结果显示,与对照组及甘露醇组相比,高糖组Wnt1、Wnt10b及β-catenin mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),脂联素干预后Wnt1、Wnt10b及β-catenin mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05);④结果提示,高糖条件可以促进人牙周膜细胞凋亡,抑制细胞增殖,对细胞周期无显著影响.而脂联素可以抑制上述作用,可能通过上调Wnt1和Wnt10b表达继而激活Wnt/β-catenin信号转导通路发挥作用.

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