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补阳还五汤对脊髓损伤后Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达的影响

         

摘要

背景:研究表明,Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白有利于脊髓损伤后肢体运动功能的恢复。目的:通过观察脊髓损伤大鼠肢体运动功能变化及Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的表达,探讨补阳还五汤对脊髓损伤后大鼠肢体运动功能改善的可能机制。方法:实验方案经福建中医药大学动物实验伦理委员会批准[批准号为SYXK(闽)2013-005]。将54只大鼠随机分为3组:假手组(n=18)、模型组(n=18)和补阳还五汤组(n=18)。假手术组切除椎板后立即缝合伤口,其余2组切除椎板后应用NYU脊髓打击器建立脊髓损伤模型。造模后第1天开始补阳还五汤组给予补阳还五汤1 mL灌胃,模型组和假手术组术后蒸馏水1 mL灌胃。干预后1,3,5,7 d对各组大鼠进行BBB肢体运动功能评分;干预7 d后取材,尼式染色观察脊髓神经元形态和免疫组织化学检测Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达;电镜观察脊髓髓鞘超微结构,Western blot检测Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的蛋白表达量。结果与结论:(1)干预第5天后,补阳还五汤组的BBB肢体运动功能评分显著高于同期的模型组(P <0.05);(2)尼式染色显示补阳还五汤组的细胞形态较为完整,细胞水肿较轻,瘀血面积较小,神经元恢复情况好于模型组;(3)电镜实验发现补阳还五汤组的髓鞘形态较模型组完整,水肿情况较轻,与尼式染色结果一致;(4)免疫组织化学显示补阳还五汤组的Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的表达量均较模型组显著增多(P <0.05);(5)Western blot显示补阳还五汤组的Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的表达量均较模型组显著增多(P <0.05);(6)结果说明,补阳还五汤能够改善脊髓损伤后大鼠的肢体运动功能障碍,其机制可能与增加Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达有关。

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