应用实时荧光定量PCR研究BBTV DNA1在香蕉不同组织中的含量

周朋; 余乃通; 章绍延; 胡加谊; 刘志昕

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为准确定量香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA1组分在香蕉组织中的分布和含量,建立以SYBR Green-Ⅰ荧光染料为标记的实时荧光定量PCR(Real Time Fluorescence Quantitative PCR)方法.利用B1-F/B1-R引物扩增海南BBTV DNA1组分并构建到pMD18T sample载体,再以B2-F/B2-R引物测定该质粒的标准曲线,其线性方程为Y=-3.247×LOG(X)+8.01,相关系数r2=0.997,扩增效率为103.2％,标准质粒检测灵敏度约为214 copies/μL.分别选取染病香蕉的嫩叶、叶鞘、假茎和球茎各100 mg,提取DNA并进行实时荧光定量PCR检测.结果表明:病株各部位均含BBTV病毒,但含量有明显差异,其中嫩叶(3.08×108 copies/mg)＞叶鞘(2.50×108 copies/mg)＞假茎(1.29×108 copies/mg)＞球茎(1.67×107 copies/mg),呈依次递减.

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来源
《热带作物学报》 |2014年第7期|1388-1392|共5页
作者
周朋; 余乃通; 章绍延; 胡加谊; 刘志昕;
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作者单位

海南大学农学院,海南海口 570228;

中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南海口571101;

中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南海口571101;

中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南海口571101;

中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南海口571101;

中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南海口571101;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类香蕉;
关键词
香蕉束顶病毒; 实时荧光定量PCR; 病毒含量;

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