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橡胶树MSAP技术体系的优化与建立

         

摘要

通过对酶切反应最少酶用量及选择性扩增体系的优化,建立了橡胶树MSAP最佳反应体系.研究结果表明,500ng橡胶树叶片基因组DNA,用EcoR I、Hpa Ⅱ和Msp I各0.5 U,在37℃酶切4 h,即可完全酶切.优化的选择性扩增体系为:Mg2+1.5 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、引物0.15μmol/L、Taq DNA聚合酶1 U;使用该体系,可获得清晰稳定的橡胶树MSAP图谱.%Based on the optimiztion of the amount of EcoR I , Hpa II , Msp I and the optimal selective amplification system, the best MSAP reaction system for Hevea brasiliensis was established. It was found that 500ng genomic DNA could be fully digested with only 0.5 U EcoR I , Hpa II , Msp I at 37 ℃ for 4 hrs in the enzyme digestion, and the optimal selective amplification system was: 1.5 mmol/L Mg2+, 250 mmol/L dNTPs, 0.15 umol/L primers, 1 U Taq enzyme. Clear and stable MSAP patterns could be obtained. Using this system.

著录项

  • 来源
    《热带作物学报》 |2011年第4期|644-647|共4页
  • 作者单位

    海南大学农学院;

    海南儋州571737;

    中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心 海南儋州571737;

    中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心 海南儋州571737;

    海南大学农学院;

    海南儋州571737;

    中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心 海南儋州571737;

    海南大学农学院;

    海南儋州571737;

    中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心 海南儋州571737;

    海南大学农学院;

    海南儋州571737;

    中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心 海南儋州571737;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 橡胶树;
  • 关键词

    橡胶树;

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