存活素反义寡核苷酸诱导肾癌细胞凋亡及机制的实验研究

宫大鑫; 何舜发; 孙志熙; 孔垂泽

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目的观察存活素反义寡核苷酸封闭存活素的表达对肾癌细胞凋亡的影响。方法采用脂质体介导的存活素反义寡核苷酸技术转染肾癌细胞786-0。电镜观察细胞超微结构,免疫组织化学、Western blot及RT-PCR方法检测存活素蛋白及mRNA表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑盐比色法检测癌细胞抑制率。酶标免疫测定caspase-3活性。结果存活素反义寡核苷酸能显著降低存活素蛋白和mRNA的表达,并呈浓度和时间依赖效应。转染后的肾癌细胞出现了大量凋亡小体。400、600、800 ng/ml反义寡核苷酸细胞凋亡率分别为（10.54±0.72）%,（12.80±0.38）%,（22.30±1.23）%,较空白对照组[（6.05±0.48）%]和正义对照组[（5.70±0.41）%]显著增加（P＜0.05）。反义寡核苷酸各组caspase-3的相对活性分别为0.052±0.009,0.078±0.004和0.092±0.002,与空白对照组（0.027±0.008）和正义对照组（0.028±0.001）相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论存活素反义寡核苷酸能显著下调存活素基因表达,明显促进肾癌细胞786-0凋亡并抑制其增殖;可能是通过上调caspase-3表达来促进凋亡。

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来源
《中华泌尿外科杂志》 |2007年第7期||共页
作者
宫大鑫; 何舜发; 孙志熙; 孔垂泽;
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作者单位

1. 中国医科大学附属第一医院泌尿外科 2. 澳门仁伯爵医院泌尿外科;

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正文语种 chi
中图分类筋腱、韧带、滑囊疾病及损伤;
关键词
反义寡核苷酸; 肾肿瘤; 存活素; 凋亡;

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