鸡新城疫病毒(NDV-XX08)单克隆抗体的制备与鉴定

银梅; 孔令芸; 张秋雨; 丰兰竹; 周洁; 岳锋; 王选年

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本研究采用鸡胚繁殖NDV-XX08,差速离心法纯化NDV,用纯化的病毒免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠的脾细胞与NSO细胞进行融合,用间接ELlSA和血凝抑制试验(HI)进行筛选,挑选效价高的杂交瘤细胞进行克隆和亚克隆,建立阳性杂交瘤细胞株,最终得到一株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,命名为4F12.采用体外细胞培养和体内诱生腹水的方法制备了其McAb.对获得的单克隆抗体采用ELISA,HI,Western-Blotting方法进行鉴定.杂交瘤细胞培养上清和腹水的ELISA效价分别为1∶160和1:3.2×104.获得的单克隆抗体与NDV具有良好的特异性反应,与鸡胚阴性尿囊液、鸡正常组织、鸡IgG、鸡传染性囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽流感检测抗原均无交叉反应性.HI试验表明,制备的单抗没有血凝抑制活性.Western-Blotting证明获得的单抗与新城疫病毒蛋白有特异性反应.经连续传代20次,冻存、复苏3次,4F12杂交瘤细胞株仍能稳定分泌抗体.

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来源
《中国兽医杂志》 |2016年第2期|3-58|共4页
作者
银梅; 孔令芸; 张秋雨; 丰兰竹; 周洁; 岳锋; 王选年;
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作者单位

河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;

河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;

河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;

新乡市红旗区动物疫病预防控制中心,河南新乡453003;

河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;

新乡学院生命科学技术学院,河南新乡453003;

新乡学院生命科学技术学院,河南新乡453003;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类负股单股RNA病毒;
关键词
鸡; 新城疫病毒; 单克隆抗体; Western-Blotting;

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