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RT-LAMP检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用

         

摘要

以鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)的N基因保守区域设计4条引物,通过优化反应条件,建立了检测IBV的逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),并进行了特异性试验、敏感性试验及临床样本检测.结果显示,建立的RT-LAMP方法对IBV参考株扩增产物的电泳呈特征性梯状条带,而新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、马立克病病毒(MDV)、传染性囊病病毒(IBDV)等的扩增产物电泳后均无扩增条带.该方法最低能梭出0.19 pg的IBV cDNA模板,敏感性比常规RT-PCR方法高1 000倍.用该方法检测了6份临床疑似IB临床病料,检出率为100%(6/6),与常规RT-PCR的符合率为100%.60 min反应结束后,离心可以看到白色沉淀物,简单直观,适用于基层实验室快速准确诊断.

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