猪IL-18在酵母中表达及活性检测

曹素芳; 祁画丽

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猪IL-18在酵母中表达及活性检测

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以pGEMT/pIL-18为模板,应用PCR法扩增出猪IL-18基因,用EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后,插入酵母表达载体pPICZαA中,经酶切、PCR扩增及序列测定,成功构建了酵母重组表达载体pPICZ/pIL-18,电击转化毕赤酵母X-33,应用Zeocin筛选获得高拷贝重组转化菌株,甲醇诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析重组pIL-18蛋白的表达,并用SephadexG200纯化表达的重组pIL-18蛋白.运用MTT法检测其生物学活性.试验结果表明,重组X-33酵母菌株能够表达分泌性pIL-18,诱导72 h表达量最高,其表达量占总蛋白表达量的38％.而且纯化的重组pIL-18蛋白具有明显促进淋巴细胞增殖的活性.

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来源
《中国兽医杂志》 |2013年第6期|32-35|共4页
作者
曹素芳; 祁画丽;
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作者单位

郑州牧业工程高等专科学校,河南郑州450011;

郑州牧业工程高等专科学校,河南郑州450011;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
猪; 白细胞介素18; 毕赤酵母; 生物活性;

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