绵羊肺腺瘤病毒内蒙株衣壳蛋白在真核细胞中的表达

斯日古楞; 么宏强; 马学恩; 周建华

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绵羊肺腺瘤病毒内蒙株衣壳蛋白在真核细胞中的表达

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为构建绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte Sheep Retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)基因真核表达载体,采用含HA标签的引物,通过PCR方法从重组原核表达质粒上扩增CA-HA融合基因片段,将其克隆至真核表达载体上.构建的真核表达质粒通过脂质体法转染293细胞和Hela细胞,用间接免疫荧光和Westhern blotting法检测目的蛋白的表达.结果表明,成功地构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CA-HA,并转染的293细胞和Hela细胞内观察到特异性荧光和检测到目的基因的表达产物,说明CA基因在真核细胞内获得表达.本试验为建立特异性的诊断试剂盒奠定了基础.

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来源
《中国兽医杂志》 |2013年第8期|3-5|共3页
作者
斯日古楞; 么宏强; 马学恩; 周建华;
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作者单位

内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018;

内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018;

内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨150030;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
绵羊肺腺瘤病病毒; CA基因; 真核表达; 间接免疫荧光法; Western blotting法;

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