惠阳胡须鸡IFN-α基因的克隆表达和重组蛋白的抗病毒活性圆二色性分析

韩春来; 汪明; 张灿; 周建民; 史喜菊

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IFN-α是一种具有很强抗病毒活性的细胞因子.从惠阳胡须鸡肝脏克隆了IFN-α基因,为新的亚型.将IFN-α成熟肽与毕赤酵母pPICZαA连接,经酶切鉴定、PCR鉴定和测序后确定目的基因无突变并且插入方向正确,将重组质粒转化到GS115中,阳性转化子经甲醇诱导表达,获得了高效分泌表达,重组IFN-α分子量约为35 kD,表达量达到了0.307 mg/ml,在CEF/VSV细胞系上的抗病毒活性为3.2×106 U/mg.圆二色实验结果表明IFN-α重组蛋白中含有53.2% α螺旋、3.1% β折叠、10.6%转角和33.1%无规谱卷曲,属于全α型蛋白.结果表明,采用毕赤酵母分泌表达了有活性的鸡IFN-α,并首次证实鸡IFN-α属于全α型蛋白.

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来源
《中国兽医杂志》 |2006年第11期|3-6|共4页
作者
韩春来; 汪明; 张灿; 周建民; 史喜菊;
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作者单位

北京市兽医卫生监督检验所,北京海淀 100044;

中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094;

中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094;

乾元浩生物股份公司,北京,海淀,100083;

中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094;

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正文语种 chi
中图分类畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂;
关键词
惠阳胡须鸡; IFN-α; 克隆; 表达; 抗病毒活性; 圆二色;

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