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利用鸡胚成纤维细胞培养禽脑脊髓炎病毒的研究

         

摘要

利用鸡胚成纤维细胞(CEF)培养禽脑脊髓炎病毒(AEV),经过六次盲传发现:AEV在CEF上无细胞病变(CPE),但利用CEF细胞上清接种SPF鸡胚,可产生不同程度的AE鸡胚病变.分别取不同时间的感染细胞上清,测定AEV浓度,结合培养条件,进而确定AEV培养的最佳时机.结果表明:以AEV在CEF上培养7天最好,病毒滴度可达102.8EID50/0. 2 ml.将经CEF培养的AEV差速离心(浓缩约500倍),接种SPF鸡胚,可产生典型的鸡胚病变, 其滴度为8×105.0EID50/0.2 ml.通过CsCl密度梯度离心提纯病毒,在电镜下观察到了大小基本一致的病毒粒子,病毒直径约为25 nm.利用AEV感染的CEF或通过 "细胞飞片" 制备荧光片,建立了间接免疫荧光快速检验CEF是否感染AEV的方法.

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