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禽腺病毒血清4型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

         
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根据禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的Hexon基因设计1对特异性引物和探针,经反应条件优化,建立了荧光定量PCR检测方法.结果 显示:以重组质粒为标准品建立的标准曲线在7.3×103拷贝/μL～7.3×108拷贝/μL具有良好的线性关系;该方法仅对FAdV-4扩增呈阳性,对NDV、AIV、IBV、IBDV、ILTV、FPV、FAdV-8a、FAdV-8b的检测均为阴性;对FAdV-4最小检出的梯度为7.3 ×101拷贝/μL,灵敏度为普通PCR的100倍;批内和批间重复试验的变异系数均小于2％.对50份临床样品进行检测,表明该方法的检出率比普通PCR方法高10％,可用于FAdV-4的快速诊断和定量分析.

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