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分泌抗猪伪狂犬病毒(鄂A株)单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

         

摘要

将本室分离鉴定的猪伪狂犬病毒(Prv)鄂A株纯化后免疫BALB/C小鼠,取免疫鼠脾细胞与经8氮鸟嘌呤(8-AG)驯化的SP2/0骨髓瘤细胞融合。经间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,挑选强阳性孔进行亚克隆,获得5株能稳定分泌伪狂犬病毒单克隆抗体(Prv-McAb)杂交瘤细胞株,分别命名为418、483、576、603、744。经体外连续传代及反复冻存、复苏,杂交瘤细胞均能稳体地分泌McAb。培养上清液及小鼠腹水ELISA效价分别为2-5~2-7和10-5~10-10。各株分泌的McAb不与疱疹病毒科中的DPV、ILTV、IBRV及PPV发生交叉反应。阻断试验结果显示阻断率均大于50%。其中603、744分泌的McAb对用PRV致敏的乳胶具有凝集特性。相加ELISA测定证实603、483、744特异性作用同一抗原位点或作用相关极为密切的抗原位点,另4种McAb作用位点有部分相关性。

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