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山楂叶提取物抗氧化活性及谱效关系研究

         

摘要

目的比较山楂叶不同提取物的体外抗氧化能力,以抗氧化作用为标准筛选出最优提取物进行总黄酮含量测定和指纹图谱研究,建立谱效关系。方法以维生素C为阳性对照,用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)清除率来检测不同山楂叶提取物的抗氧化活性,筛选出抗氧化作用最强的提取物。以不同批次筛选出的提取物为研究对象,运用高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC CSHTM C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相以乙腈-0.1%甲酸水进行梯度洗脱,流速0.15 mL·min-1,柱温30℃,进样量3μL,检测波长320 nm,建立UPLC指纹图谱。采用可见-紫外分光光度法测定总黄酮的含量。用双变量相关性分析、灰色关联法研究其谱效关系。结果4种提取物都有一定抗氧化活性,其中2015年版《中国药典》收录山楂叶提取物清除DPPH和ABTS自由基的能力最强,IC50值与总黄酮的含量有较强的相关性(r=-0.896,r=-0.808),UPLC指纹图谱共标定出33个共有峰,33个共有峰与清除自由基的关联度较高,关联度均大于0.62。结论以"谱-效"结合的思路为山楂叶提取物及其制剂的质量控提供依据。

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