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沉默PDE4B对内毒素刺激的小胶质细胞内cAMP的影响

         
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摘要

目的 观察磷酸二酯酶4(phosphodiesterase 4,PDE4)4种亚型(A、B、C和D)的siRNA对内毒素刺激前后小胶质细胞内cAMP的影响.方法 24孔板接种原代培养的小胶质细胞,收集细胞测定PDE4 4种亚型的蛋白含量.随机将细胞分为空白对照组、LPS组、单纯载体组、错配siRNA 组、PDE4A-siRNA组、PDE4B-siRNA组、PDE4C-siRNA组和PDE4D-siRNA组,空白对照组与LPS组细胞不进行转染;其余5组分别转染LipofectaminTM RNAiMAX、错配siRNA、PDE4A siRNA、PDE4B siRNA、PDE4C siRNA和PDE4D siRNA,48 h后收集各组细胞测定4种亚型mRNA及细胞内cAMP的表达水平;除空白对照组外,其余7组细胞在转染48 h后分别给予100 μg·L-1 LPS,刺激30 min后收集各组细胞测定细胞内cAMP的浓度.结果 PDE4 4种亚型蛋白均在小胶质细胞内表达;转染48 h后,PDE4A-siRNA、PDE4B-siRNA、PDE4C-siRNA和PDE4D-siRNA可分别明显抑制相应PDE4亚型mRNA 的表达(P<0.05),各组细胞内cAMP的含量无明显改变(P＞0.05);LPS 刺激后各组细胞内cAMP的含量均比空白对照组明显增高(P<0.05),与LPS组相比,仅PDE4B-siRNA组细胞内的cAMP含量明显升高(P<0.05).结论 PDE4B-siRNA可有效抑制PDE4B mRNA的表达并能明显升高LPS刺激后细胞内的cAMP含量.

著录项

  • 来源
    《中国药理学通报》 |2013年第11期|1541-1545|共5页
  • 作者

    和晓韵; 和底妍; 张利东; 刘健; 刘清珍; 李伟彦; 嵇晴;

  • 作者单位

    南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科;

    江苏;

    南京;

    210000;

    南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科;

    江苏;

    南京;

    210000;

    南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科;

    江苏;

    南京;

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    南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科;

    江苏;

    南京;

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    南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科;

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    南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科;

    江苏;

    南京;

    210000;

    南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院麻醉科;

    江苏;

    南京;

    210000;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 酶制剂;
  • 关键词

    小胶质细胞; 磷酸二酯酶4; 神经病理性疼痛; RNA干扰; 内毒素; 环磷酸腺苷;

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