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H2O2预处理对多巴胺损伤PC12细胞的适应性保护作用

         

摘要

目的探讨H2O2预处理对多巴胺(dopamine, DA)损伤PC12细胞的适应性保护作用.方法透射电镜、Hoechst染色和PI染色流式细胞仪(flow cytometry, FCM)观测细胞凋亡,MTT代谢率法观察细胞线粒体氧化磷酸化功能状态,Rh123染色FCM检测细胞线粒体膜电位(△Ψm).结果 50 μmol·L-1 DA作用PC12细胞24 h后,电镜可观察到PC12细胞体积缩小,核染色质浓缩、边集,核碎裂等细胞凋亡征象.Hoechst 33258 染色显示,DA(50 μmol·L-1)作用24 h后,经H2O2预处理的PC12细胞的凋亡量较未预处理的明显减少.50、100和200 μmol·L-1 DA作用24 h后,PC12细胞的凋亡率分别为(20.9±1.8)%、(40.5±6.4)%、(88.1±3.9)%,而经H2O2预处理的PC12细胞的凋亡率分别下降至(4.9±2.9)%、(12.0±1.4)%、(61.5±3.4)%(P<0.01).20、40、80 μmol·L-1 DA作用细胞24 h后,细胞MTT代谢率明显下降,而H2O2预处理抑制20、40、80 μmol·L-1 DA引起的PC12细胞MTT代谢率的下降(P<0.01).50 μmol·L-1 DA作用24 h后,PC12细胞的平均Rh123荧光强度由正常对照的(46.87±0.33)下降至(4.39±2.93),而经H2O2预处理的PC12细胞,其平均Rh123荧光强度仅下降到(10.50±0.28),下降程度明显减轻(P<0.01).结论 H2O2预处理对DA损伤PC12细胞具有适应性保护作用.

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