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甲基化特异性PCR检测PRAME基因启动子低甲基化30例及其临床应用

         

摘要

目的 建立实时定量甲基化特异性PCR(RQ-MSP)法检测急性髓系白血病(AML)患者黑色素瘤优先表达的抗原(PRAME)基因低甲基化水平,初步评价其临床意义.方法 用亚硫酸氢盐修饰后的基因组DNA为模板,建立EvaGreen染料法RQ-MSP检测PRAME基因低甲基化水平方法,检测18例(对照组)和30例(AML组)患者的骨髓单个核细胞中PRAME基因启动子低甲基化水平.结果 RQ-MSP融解曲线呈单一峰,标准品 5×107~5×102 copy/μL重复性良好;AML患者PRAME基因低甲基化水平(0.96~4 508.96,中位772.42)明显高于对照组(0~100.00,中位25.29),差异有统计学意义(P=0.002).结论 建立的PRAME基因低甲基化RQ-MSP法特异性、重复性和灵敏性良好,可用于AML初诊和病情监测.

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